Полимераз чылбыр реакциясе, кыскартылган кебекPCRИнглиз телендә, билгеле ДНК фрагментларын көчәйтү өчен кулланылган молекуляр биология техникасы.Аны организмнан тыш махсус ДНК репликасы дип санарга мөмкин, ул бик аз ДНКны арттыра ала.Гомумән алгандаPCRреакция процессы, матдәләрнең бер сыйныфы мөһим роль уйный - ферментлар.
1. Так ДНК
Беренче көннәрдә экспериментлардаPCR, галимнәр Escherichia coli ДНК полимераз I кулландылар, ләкин бу фермент белән проблема бар: цикл эшләнгән саен яңа ферментны тулыландырырга кирәк, бу операция адымнарын бераз катлауландыра һәм тулысынча автоматик көчәйтү кыен.Бу проблема галимнәр очраклы рәвештә Так ДНК полимеразын Термус суыннан аерганнан соң чишелде. Шул вакыттан алып, ДНКны автоматик көчәйтү чынбарлыкка әйләнде.Бу ферментның ачылышы да ясыйPCRтехнология уңайлы, практик һәм универсаль технология.Хәзерге вакытта Так ДНК полимеразы - ДНК комплектларында иң еш очрый торган полимераз.
2. PfuDNA
Aboveгарыда әйтелгәнчә, Taq DNase зур хата бар, шуңа күрә галимнәр Taq DNA полимеразын билгеле бер дәрәҗәдә үзгәрттеләр, туры килмәү аркасында конкрет булмаган көчәйтүдән саклану өчен, тест нәтиҗәләре дөрес булмаганга.Ләкин Так ДНК полимеразының модификациясе бүлмә температурасында ДНК полимеразының эшчәнлеген тоткарлый ала.PfuDNA полимеразы Так ДНК полимеразының югарыдагы кимчелекләрен каплый ала, шулай итеп PCR реакциясе нормаль рәвештә башкарыла ала, һәм максатлы ген көчәйтүнең уңыш дәрәҗәсе эффектив яхшыра ала.
3. Кире транскрипт
Кире транскриптаз 1970-нче елда ачылган. Бу фермент РНКны шаблон, dNTP субстрат буларак куллана, төп парлаштыру принцибын үтәп, 5′-3 ′ юнәлешендә РНК шаблонына тулыландырылган ДНК бер полосасын синтезлый.Кире транскриптаз беренче чиратта ДНК яки РНК шаблоннарындагы ДНК полимераз эшчәнлегенә бәйле, шуңа күрә 3′-5 ′ экзонуклаз активлыгы юк.Ләкин, аның RNase H эшчәнлеге бар, ул кире транскриптазның синтез озынлыгын билгеле бер дәрәҗәдә чикли.Кыргый кире транскриптазның түбән тугрылыгы һәм термостлылыгы аркасында галимнәр аны үзгәрттеләр.
ӨченPCRэкспериментлар, төп куллану материаллары ： индивидуаль PCR трубасы, 4/8 полосалы PCR трубасы, PCR тәлинкәләре.
ЛабиоPCR кулланутүбәндәгеләр барөстенлекләре:
PCR тәлинкәләре: Термаль велосипедның киң яраклашуы;Contrastгары контраст, җиңел яхшы идентификация;яхшы флюоресенция чагылышы; яхшыҗылылык үткәрү;Сертификатланган DNase, RNase, DNA, PCR ингибиторлары, һәм пирогенсыз сынадылар.
Индивидуаль PCR трубалары: Парлануга чыдам; яхшыҗылылык үткәрү;искиткеч оптик ачыклык; сертификатланган DNase, RNase, DNA, PCR ингибиторлары, һәм пирогенсыз сынадылар.
4/8-полосалар PCR трубалары: Ультра-нечкә диварлар; югары ачыклык; яхшы флюоресенция чагылышы;фармацевтика сәнәгатендә, азык-төлек сәнәгатендә һәм молекуляр биологиядә куллана ала; югары сыйфатлы, гыйффәтле PP материалы; Сертификатланган DNase, RNase, DNA, PCR ингибиторлары, һәм пирогенсыз сынадылар.
Пост вакыты: июнь-09-2023